Alfa-amilaz ve gama-amilaz Enzimlerinin Çapraz Bağlı Enzim Agregatları (CLEA) Şeklinde İmmobilizasyonu


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi, Lisansüstü Eğitim Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2013

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Arif Sercan ŞAHUTOĞLU

Danışman: Cahit Akgül

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada, üç farklı amilaz enziminin çapraz bağlı enzim agregatları biçiminde immobilizasyonu gerçekleştirildi. Bu amaçla Aspergillus oryzea ve Bacillus licheniformis alfa - amilaz enzimleri ile Aspergillus niger gama - amilaz enzimi kullanıldı. Enzimler 1,2 - dimetoksietan, amonyum sülfat, aseton, dimetilsülfoksit ve etanol kullanılarak agregatlaştırıldı. Elde edilen agregatların glutaraldehit ile çapraz bağlanması sonucunda çözünmez formda, katalitik olarak aktif enzim agregatları elde edildi. Belirli optimizasyon koşulları altında Aspergillus oryzea alfa - amilazı, Bacillus licheniformis alfa - amilazı ve Aspergillus niger gama - amilazı için sırasıyla % 21,8; % 94,1 ve % 41,2 aktivite geri kazanımları gözlendi. Aspergillus oryzea alfa - amilazı ve Aspergillus niger gama - amilazı için aktivite geri kazanımı değerlerinin hedeflenenden düşük bulunması sebebiyle, bu enzimlerin çapraz bağlanmasında glutaraldehit yerine dekstran polialdehit de denendi. Bu amaçla glutaraldehit için optimize edilen koşullarda farklı dekstran polialdehit miktarları ile çapraz bağlama reaksiyonları gerçekleştirildi. Bunun sonucunda Aspergillus oryzea alfa - amilazı için % 60,0 aktivite geri kazanımı gözlendi; Aspergillus niger gama - amilaz enzimi için ise herhangi bir aktivite geri kazanımı gözlenemedi. Elde edilen Bacillus licheniformis alfa - amilazı çapraz bağlı enzim agregatlarına ait bazı kinetik parametreler hesaplandı. Anahtar Sözcükler: Enzim immobilizasyonu, çapraz bağlı enzim agregatları, amilaz, glukoamilaz, glutaraldehit, dekstran polialdehit